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二氧化碳培養(yǎng)箱:細胞,組織培養(yǎng)和微生物測試的主要部分

二氧化碳培養(yǎng)箱是從事細胞或組織培養(yǎng)的傳統(tǒng)生物實驗室的支柱。孵育器提供了設(shè)計成模擬細胞的天然環(huán)境的穩(wěn)定環(huán)境:pH 7.2-7.5,溫度37℃,相對濕度約95%。控制約5%的CO 2 濃度以匹配生理條件并維持恒定的pH。

在需要維持,擴增或培養(yǎng)細胞的幾個小時到許多周期的任何地方使用孵育器。常見的應(yīng)用包括用于細胞庫,病毒學,微生物測試(環(huán)境和醫(yī)學/診斷),小規(guī)模生產(chǎn)細胞產(chǎn)物(蛋白質(zhì),基因,毒素,病毒),體外受精和藥物測試的制造細胞的擴展。非常大體積的應(yīng)用如臨床微生物學通常使用大的覆蓋培養(yǎng)箱。

Sanyo(Wood Dale,IL)戰(zhàn)略發(fā)展和營銷經(jīng)理Deepak M. Mistry指出,生物治療和干細胞研究的上升為高性能二氧化碳培養(yǎng)箱帶來了額外的需求。“屬于藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)的應(yīng)用程序,采用高度監(jiān)管的協(xié)議,廣泛使用培養(yǎng)箱。

驗證培養(yǎng)箱操作和清潔受管制工作的需要是對培養(yǎng)箱內(nèi)部條件的嚴格控制背后的驅(qū)動力。當有人打開門來引入或取出樣品時,培養(yǎng)箱內(nèi)的條件快速變化。在一些情況下,細胞的健康或活力可能受損。Mistry告訴實驗室經(jīng)理,“與培養(yǎng)箱一樣,條件的一致性是培養(yǎng)箱的一個問題。三洋和其他公司使用紅外傳感器,自動測量CO 2濃度并啟動氣體濃度的重新平衡。

保持清潔

保持培養(yǎng)箱內(nèi)的清潔是**重要的,特別是對于同時容納幾個細胞系或快速改變樣品的單元。畢竟,培養(yǎng)箱不僅為感興趣的細胞提供理想的生長條件,而且為侵入性真菌,酵母和細菌提供理想的生長條件。

傳統(tǒng)上,通過熱或紫外(UV)光實現(xiàn)消毒。熱是有效的,但是是能量密集的并且施加材料的應(yīng)力。紫外線也能很好地工作,但只在視線上:沒有直接照射的角落和裂隙可能仍然受到污染。

三洋已經(jīng)率先使用過氧化氫氣體進行培養(yǎng)箱消毒。氣體滲透箱內(nèi)的每個表面區(qū)域并提供接近100%的病原體殺滅。該公司聲稱,在去除細胞,清潔和引入新細胞之間的循環(huán)時間在過氧化物消毒后大約兩小時。

幾家供應(yīng)商制造過氧化物滅菌設(shè)備,這些設(shè)備在細胞培養(yǎng),藥物和食品安全工作中正在進行。Mistry提到兩個:Steris(Mentor,OH)和Bioquell(Hampshire,UK)。

保持研究或生物制造中使用的培養(yǎng)細胞的健康是**關(guān)重要的 - 不僅是在培養(yǎng)箱中,而且在使用和儲存期間。“由于細胞系可能需要幾周或幾個月的時間,它們非常昂貴,”Mistry說。“用戶希望他們離開培養(yǎng)箱后可以活幾個月。

大衛(wèi)·克雷格,在產(chǎn)品經(jīng)理粘結(jié)劑(波希米亞,紐約州),看到了三氣培養(yǎng)箱,這是傳統(tǒng)的二氧化碳的需求不斷增加2結(jié)合了氧氣控制設(shè)備。氧氣通常在15體積%和20體積%之間; 這里O 2低**0.2%。

術(shù)語“三氣體”是指用于CO 2,氮氣和氧氣的單獨的連接。“低水平是通過注入氮氣驅(qū)出氧氣實現(xiàn)的,”Craig說。

三氣體單元在處理在特定大氣條件下蓬勃生長的組織的生物學和腫瘤學實驗室中是流行的。例如,它們用于在較低氧濃度下在低氧和干細胞下生長的癌細胞。組織再生研究的爆炸是培養(yǎng)箱制造商的福音。“這個想法是復(fù)制生理生長條件。

很多熱空氣

BINDER專門從事熱空氣滅菌,發(fā)生在180°C。根據(jù)Craig,滅菌提供**強大和可靠的清潔。“下一個**接近的,在140度去污,不會刪除一切,而消毒在90度只是敲落一些生物。你需要**少170度,以消除不僅僅是微生物和細胞,而是DNA。

熱空氣滅菌實際上消除了冷凝 - 微生物的繁殖地,并且不需要使用HEPA過濾。HEPA單元是昂貴的,并且是另一種潛在的污染源。

也許**有吸引力的滅菌的特點是,它發(fā)生無需用戶干預(yù)。“你完成一個實驗,按一個按鈕,第二天早上你準備好了,”克雷格說。滅菌周期僅需10小時。清潔培養(yǎng)箱通常包括拆卸,高壓滅菌部件和手洗。

“重要的是要記住,CO2培養(yǎng)箱不只是生長你想要的東西; 他們也成長你不想要的東西,“Craig說。