如果您知道要尋找什么,那么 您的細(xì)胞培養(yǎng)和組織培養(yǎng)工作的所在地幾乎可以滿足您的所有需求。的培養(yǎng)箱將保護(hù)細(xì)胞免于在溫度,濕度,CO廣泛變化2水平和O 2級(jí)水平(也被稱為缺氧,或低氧條件)。孵化器也是您下一個(gè)重要想法的避風(fēng)港。在這里,您可以找到一些重要的品質(zhì)以及在孵化器中尋找什么,您的細(xì)胞遠(yuǎn)離家鄉(xiāng)。
溫度控制
每當(dāng)有人打開培養(yǎng)箱的門時(shí),它們會(huì)破壞室內(nèi)溫度。溫暖和涼爽的空氣流在內(nèi)部旋轉(zhuǎn),孵化器的溫度控制系統(tǒng)必須能夠?qū)?nèi)部溫度恢復(fù)到設(shè)定水平。水套是一種使孵化器不易受溫度波動(dòng)影響的機(jī)制; 在發(fā)生電源故障時(shí),水套可能特別有價(jià)值。
雖然水套具有許多優(yōu)點(diǎn),但也存在缺點(diǎn):維護(hù)包括排水和填充水以及添加除藻劑; 此外,水足夠重,使得在沒有shou先排出夾套的情況下難以移動(dòng)培養(yǎng)箱。為了減輕負(fù)擔(dān),Caron**近推出了新的GelJacket™技術(shù)。10立方英尺GelJacket臺(tái)式二氧化碳培養(yǎng)箱(在非冷凍或冷藏模型提供)保持均勻的加熱,并且還包括其他重要特征,諸如用于CO一個(gè)凈化循環(huán),紅外線(IR)傳感器2控制(見下文)和沒有水盤的濕度控制(見下文)。Caron 營銷傳播總監(jiān)Leah Harris說:“Caron的新型GelJacket培養(yǎng)箱通過保留比二氧化碳培養(yǎng)箱中任何其他jue緣技術(shù)更多的熱量,輕松超過水套培養(yǎng)箱的熱保護(hù)。“此外,GelJacket培養(yǎng)箱還包括一個(gè)90?C濕熱去污循環(huán),不適用于水套。GelJacket的密封凝膠無需維護(hù),重量輕,幾乎沒有泄漏的風(fēng)險(xiǎn)。“
另一種夾套式溫度調(diào)節(jié)器由BINDER提供,并包含在其**新的CB型號(hào)中,包括其二氧化碳培養(yǎng)箱系列。CB緊湊且節(jié)省空間,同時(shí)保留了其較大表兄弟的所有先進(jìn)功能。例如,VENTAIR™氣套系統(tǒng)可保持精確的溫度和均勻的溫度分布,并可在門開啟后加速設(shè)定溫度的恢復(fù)。在室內(nèi),“APT.line™預(yù)熱室技術(shù)[確保]在所有機(jī)架上的準(zhǔn)確和均勻的生長條件,”BINDER產(chǎn)品經(jīng)理Andreas Baeurer說。與CB孵化器一樣小,具有吸引用戶的優(yōu)勢(shì):“在能源使用和CO方面,它比CB 150型號(hào)的成本效益高45%2消費(fèi),“Baeurer說。
三洋的MCO-19M多氣體培養(yǎng)箱還采用空氣夾套系統(tǒng)進(jìn)行溫度調(diào)節(jié)。“使用SANYO**的直接加熱和空氣夾套調(diào)節(jié)系統(tǒng)控制溫度,”SANYO生物醫(yī)學(xué)部門歐洲**產(chǎn)品經(jīng)理Paul Freeland說。“這種直接加熱與周圍空氣夾套的組合可在開門后提供快速響應(yīng),并具有出色的溫度均勻性,可將培養(yǎng)樣品保持在**佳溫度。”
新不倫瑞克科學(xué)的GALAXY®CO2孵化器已經(jīng)取代了傳統(tǒng)的套設(shè)計(jì)的需要,而使用無風(fēng)扇系統(tǒng)與六面直接加熱分布。New Brunswick Scientific**產(chǎn)品經(jīng)理Thomas Uschkureit說:“獨(dú)特的系統(tǒng)可在腔室內(nèi)提供溫和的對(duì)流循環(huán),實(shí)現(xiàn)溫度和氣體的均勻分布。” “相對(duì)于溫度和CO的大幅波動(dòng)的銀河系統(tǒng)警衛(wèi)2通常在傳統(tǒng)的強(qiáng)制空氣培養(yǎng)系統(tǒng)中觀察到可以震動(dòng)細(xì)胞。“Uschkureit補(bǔ)充道,”通過移除傳統(tǒng)風(fēng)扇,Galaxy培養(yǎng)箱消除了經(jīng)典的重復(fù)污染源,同時(shí)通過啟用整個(gè)培養(yǎng)箱(包括鞋面)來**大化內(nèi)部空間貨架 - 待用。此外,由于沒有風(fēng)扇,因此不需要昂貴的內(nèi)部HEPA過濾器,需要經(jīng)常更換。“
濕度控制
保持理想的加濕是必要的,因?yàn)樗梢苑乐辜?xì)胞培養(yǎng)物變干。同時(shí),它支持維持均勻滲透壓的重要功能。BINDER的CO2培養(yǎng)箱,包括其**新的緊湊型CB型號(hào),使用BINDER的Permadry®系統(tǒng)控制內(nèi)腔內(nèi)的濕度。“Permadry®加濕系統(tǒng)可在相對(duì)濕度超過95%的情況下確保干燥,無冷凝的墻壁,”Baeurer說。“通過水盤進(jìn)行簡單的水交換,可以目視檢查水位,并且更換水很容易”。Permadry®還可以縮短在門打開等中斷后恢復(fù)設(shè)定濕度水平所需的時(shí)間。賽默飛世爾科技提供無鍋,快速響應(yīng)的濕度系統(tǒng),使用內(nèi)置于培養(yǎng)箱室內(nèi)的濕度水槽。“該系統(tǒng)還具有光學(xué)水位傳感器,可通過我們的iCAN觸摸屏用戶界面通過聲音警報(bào)和可視指示告訴用戶何時(shí)需要重新填充濕度水,”CO的全球產(chǎn)品經(jīng)理Douglas Wernerspach說道。2在Thermo Fisher Scientific孵育。“我們的Heracell 150i和240i型號(hào)具有此功能。”
培養(yǎng)箱內(nèi)部的氣流可導(dǎo)致培養(yǎng)基蒸發(fā)(可能改變培養(yǎng)基的相對(duì)組成)。防止樣品干燥不僅是加濕控制的功能 - 它還受到腔室內(nèi)發(fā)生的氣流量和類型的影響。“該CO2 /空氣混合物被注入通過噴嘴的內(nèi)室; 由于產(chǎn)生的文丘里效應(yīng),混合物是均勻分布的,“Baeurer說。“這消除了對(duì)風(fēng)扇的需求,這會(huì)產(chǎn)生湍流并使清潔變得復(fù)雜。”出于類似的原因,NuAire減少其孵化器內(nèi)的氣流,以避免干燥細(xì)胞培養(yǎng)物。“閉環(huán)HEPA過濾系統(tǒng),”NuAireG際銷售副總裁Buck Richerson表示,“這是所有NuAire水套型號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)配置,并將很快成為所有直熱型號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)配置,每30天減少一次空氣交換的氣流內(nèi)腔內(nèi)的分鐘,**大限度地減少了細(xì)胞樣品的蒸發(fā)或干燥。“New Brunswick從另一個(gè)角度處理樣品干燥 - 提供主動(dòng)加濕選項(xiàng),可快速加濕腔室,用戶可定義設(shè)置為95%濕度和外部UV加濕大氣消毒。
CO2控制
在培養(yǎng)箱內(nèi) 維持健康的CO2水平是重要的,因?yàn)镃O2與細(xì)胞培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)相互作用以確定培養(yǎng)基的pH。其中一個(gè)**重要的選擇,使對(duì)CO2的控制是什么類型的CO2,你想你的傳感器孵化器有。許多孵化器使用更傳統(tǒng)的導(dǎo)熱(TC)傳感器或更新型的紅外傳感器。
Uschkureit說,“傳統(tǒng)的熱導(dǎo)率傳感器是在腔室的濕度和溫度的波動(dòng)變化高度敏感使得它不適合于使用CO2孵化器。獨(dú)特的是,Galaxy紅外傳感器可以在整個(gè)高溫消毒循環(huán)期間保留在腔室中,確保所有腔室組件都被消毒。
在卡隆,哈里斯說,很多客戶需要CO2孵化器還配備了紅外傳感器。“所有Caron CO2培養(yǎng)箱都是在過去四年內(nèi)設(shè)計(jì)出來的,并采用了新的節(jié)能組件和技術(shù),”她說。“卡隆達(dá)到-在CO2孵化器[包括] IR傳感器,控制濕度,無水盤和高耐熱去污。”對(duì)于MCO-19培養(yǎng)箱系列,SANYO包括紅外線CO2與對(duì)照傳感器一個(gè)新的,連續(xù)自動(dòng)調(diào)零功能。“三洋專有的CO2傳感器不受通常與頻繁的門開相關(guān)聯(lián)的濕度或溫度的變化,” Freeland的說。“連同CO的復(fù)雜的PID控制的微處理器2MCO-19M 和O 2水平提供精確控制和快速恢復(fù)。“
O 2控制
近年來,研究人員對(duì)測(cè)試不同水平的O 2對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的影響的實(shí)驗(yàn)表現(xiàn)出更多的興趣。“在為重要文化提供優(yōu)化環(huán)境的努力中,科學(xué)家們?cè)絹碓疥P(guān)注控制細(xì)胞暴露的氧氣濃度,”Wernerspach說。“這增加了對(duì)具有可變氧控制的培養(yǎng)箱的需求,以提供減少的O 2氣氛,更接近地模擬生理氧氣條件。”
HypOxygen的HypOxystation是一種專門用于細(xì)胞培養(yǎng)的低氧培養(yǎng)箱,可單獨(dú)控制氧氣,二氧化碳,溫度和濕度。“研究人員可以控制輸出2在0.1%的增量從0.1%**] 20%,CO2 0.1%的增量從0.1%**] 15%,”朱莉馬格魯?shù)?,營銷和銷售人員在說微生物學(xué)G際,賣HypOxystation。在其他應(yīng)用中,HypOxystation用于檢查缺氧在腫瘤微環(huán)境中的作用。“具有如此精確的控制和原位操作細(xì)胞的能力 在不必改變孵化環(huán)境的情況下,可以在精確的氧張力范圍內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)研究。“
HypOxystation的實(shí)時(shí)反饋系統(tǒng)可讓您監(jiān)控和調(diào)整O 2和CO2水平; 例如,氧氣分析可讓您設(shè)定氧氣張力范圍,并讓它們?cè)谟脩舳x的時(shí)間段內(nèi)自動(dòng)調(diào)整。對(duì)于穩(wěn)定的溫度和氣體混合物,HypOxystation使用由兩個(gè)切向風(fēng)扇產(chǎn)生的恒定空氣循環(huán),該風(fēng)扇沿著腔室的長度延伸。“我們**近的創(chuàng)新是HypOxystation的遮光罩,它允許細(xì)胞在黑暗中培養(yǎng),”Magruder說。
新不倫瑞克銀河孵化器還提供在三個(gè)范圍內(nèi)的氧氣控制:1 - 19%為**常見的缺氧的應(yīng)用,0.1 - 19%更嚴(yán)格ø 2級(jí)的要求,和1 - 95%的高氧和缺氧培養(yǎng)。“ 干細(xì)胞和原代細(xì)胞研究正在快速發(fā)展,其他近期研究表明,對(duì)于許多細(xì)胞類型,維持細(xì)胞功能需要更接近生理氧濃度[2**5%]的環(huán)境,”Uschkureit說。 。“我們提供高度調(diào)節(jié)的CO2和O 2環(huán)境,能夠密切模擬生理常氧條件,并為干細(xì)胞和原代細(xì)胞工作提供**佳環(huán)境。”
防止污染
除了為細(xì)胞維持正確的培養(yǎng)條件外,另一個(gè)主要挑戰(zhàn)是防止培養(yǎng)物污染。當(dāng)受污染的手或手套接觸到培養(yǎng)箱內(nèi)部時(shí),或者當(dāng)打開的門使其易受空氣污染物侵害時(shí),可能會(huì)引入污染物。NuAire的閉環(huán)HEPA過濾系統(tǒng)等過濾系統(tǒng)可以幫助減少空氣傳播物種的污染。“[它]在內(nèi)部培養(yǎng)箱內(nèi)提供連續(xù)的100級(jí)清潔空氣條件,”Richerson說。“該系統(tǒng)可確保在有機(jī)污染細(xì)胞培養(yǎng)工作之前消除任何空氣污染物。”Thermo Fisher Scientific的孵化器也在其內(nèi)部使用HEPA空氣過濾,
為了清潔培養(yǎng)箱的內(nèi)表面,大多數(shù)模型使用滅菌周期(在高溫下運(yùn)行,因此必須shou先清空培養(yǎng)箱)。NuAire的型號(hào)NU-5510(E)有兩種類型的滅菌周期(+ 95°C濕法和+ 145°C干燥)。它還使用氣壓,另一種孵化器防御裝置,在門洞開啟時(shí)保護(hù)文化。“內(nèi)腔保持在輕微的正壓力下,因此孵化器可以'呼吸',”Richerson說。“沒有負(fù)壓可防止任何潛在污染物從外部進(jìn)入內(nèi)腔,污染環(huán)境空氣。”此外,如果孵化器內(nèi)部有圓角,這有助于通過化學(xué)消毒更容易清潔,因?yàn)闆]有污染物可以生長的緊密裂縫。同樣,Uschkureit說,對(duì)于所有新不倫瑞克模型,“這些腔室是由一塊不銹鋼壓制而成,沒有焊縫或接縫,消除了污染物可以收集的傳統(tǒng)區(qū)域,以及輕松擦拭。當(dāng)然,我們也提供高溫(120°C)消毒選項(xiàng)和銅內(nèi)部選項(xiàng)。“Baeurer還表示,除了356°F的熱空氣消毒外,BINDER還使用了”無縫深拉不銹鋼內(nèi)腔[這樣可以將污染風(fēng)險(xiǎn)降****低。“
獲得低維護(hù),持續(xù)保護(hù)的另一種方法是選擇內(nèi)表面為100%銅的培養(yǎng)箱,其具有抗微生物特性。這可以防止由使用者或可能由培養(yǎng)板底部引入的污染物。“銅的天然抗菌性能已經(jīng)有一段時(shí)間了,”Wernerspach說。“然而,由于**近一些高調(diào)的研究表明,100%純銅具有強(qiáng)大的能力,能夠迅速消滅高水平的MRSA和許多其他細(xì)菌菌株,因此對(duì)全銅固體內(nèi)部的孵化器的需求非常高今天。”
SANYO對(duì)污染難題的多層次方法也強(qiáng)調(diào)預(yù)防。“SANYO的InCusaFe®富銅不銹鋼內(nèi)部不斷抑制霉菌,真菌,支原體和細(xì)菌的生長,可選的**SafeCell™UV系統(tǒng)可消除空氣和水污染物,而不會(huì)損害細(xì)胞培養(yǎng),”Freeland說。SANYO還采用了低溫H 2 O 2滅菌技術(shù)。“當(dāng)需要通過驗(yàn)證進(jìn)行全室凈化時(shí),三洋新的快速過氧化氫凈化選項(xiàng)將停機(jī)時(shí)間限制在3小時(shí)以內(nèi),使其適用于所有實(shí)驗(yàn)室,特別是那些使用GMP / GLP的實(shí)驗(yàn)室。”
根據(jù)Wernerspach的說法,細(xì)胞培養(yǎng)樣品越來越有價(jià)值(用于體外受精,干細(xì)胞研究和基于細(xì)胞的疫苗生產(chǎn)等應(yīng)用),因此我們應(yīng)采取更多預(yù)防措施來保護(hù)它們。“污染預(yù)防技術(shù)應(yīng)被視為必不可少的,為培養(yǎng)活動(dòng)提供安全網(wǎng),并防止有價(jià)值工作的潛在損失,”他說。“通過防病毒軟件定期保護(hù)您的計(jì)算機(jī)文件的方式很多,每次打開培養(yǎng)箱門時(shí)都要保護(hù)您的污染控制功能也被視為必需品。”